Kako pripraviti mikroskopske preparate

Tom Grill / Getty Images

Mokri nosilci se uporabljajo za žive vzorce, prozorne tekočine in vodne vzorce. Mokra montaža je kot sendvič. Spodnji sloj je diapozitiv. Sledi vzorec tekočine. Majhen kvadrat iz prozornega stekla ali plastike (pokrivno stekelce) se postavi na vrh tekočine, da se zmanjša izhlapevanje in zaščiti leča mikroskopa pred izpostavljenostjo vzorcu.

Za pripravo mokre montaže z uporabo ploščatega drsnika ali drsnika z depresijo:

1. Na sredino predmetnega stekelca kanite kapljico tekočine (npr. vode, glicerina, potopnega olja ali tekočega vzorca).
2. Če ogledujete vzorec, ki še ni v tekočini, s pinceto postavite vzorec v kapljico.
3. Eno stran pokrovnega stekelca postavite pod kotom, tako da se njegov rob dotika objektnega stekelca in zunanjega roba kapljice.
4. Počasi spuščajte pokrovno stekelce, pri čemer se izogibajte zračnim mehurčkom. Večina težav z zračnimi mehurčki izvira iz tega, da pokrovnega stekelca ne namestite pod kotom, da se ne dotaknete kapljice tekočine ali da uporabite viskozen (gosta) tekočina. Če je kapljica tekočine prevelika, bo pokrovno stekelce plavalo na objektnem stekelcu, zaradi česar je težko izostriti predmet z mikroskopom.

Nekateri živi organizmi se premikajo prehitro, da bi jih lahko opazovali v mokri gori. Ena od rešitev je, da dodate kapljico komercialnega pripravka, imenovanega 'Proto Slow'. Kapljico raztopine dodamo kapljici tekočine pred nanosom pokrovnega stekelca.

Nekateri organizmi (npr Paramecij ) potrebujejo več prostora od tistega, ki nastane med pokrovnim stekelcem in ravnim objektnim stekelcem. Če dodate nekaj pramenov vate iz robčka ali tampona ali dodate drobne koščke zdrobljenega pokrovnega stekelca, boste dodali prostor in 'ogradili' organizme.

Ko tekočina izhlapeva z robov stekelca, lahko živi vzorci umrejo. Eden od načinov za upočasnitev izhlapevanja je, da z zobotrebcem obložite robove pokrovnega stekelca s tankim robom vazelin preden spustite pokrovno stekelce na vzorec. Nežno pritisnite na pokrovno stekelce, da odstranite zračne mehurčke in zaprete stekelce.

02 od 05

Diapozitivi za suho montažo

Wladimir Bulgar / Znanstvena fototeka / Getty Images

Stekelca za suho montažo so lahko sestavljena iz vzorca, nameščenega na objektnem stekelcu, ali vzorca, prekritega s pokrovnim stekelcem. Za mikroskop z nizko močjo, kot je na primer disekcijski daljnogled, velikost predmeta ni kritična, saj bo preiskana njegova površina. Za sestavljeni mikroskop mora biti vzorec zelo tanek in čim bolj raven. Ciljajte na eno celica debeline do nekaj celic. Morda bo treba za britje dela vzorca uporabiti nož ali britvico.

1. Predmetno stekelce postavite na ravno površino.
2. S pinceto ali kleščami položite vzorec na objektno stekelce.
3. Postavite pokrovček na vrh vzorca. V nekaterih primerih je v redu, če si vzorec ogledate brez pokrovnega stekelca, če pazite, da se vzorec ne zaleti v mikroskopsko lečo. Če je vzorec mehak, lahko naredite 'squash slide'. narahlo pritiskanje na pokrovno stekelce.

Če vzorec ne ostane na predmetnem stekelcu, ga lahko zavarujete tako, da stekelce tik pred dodajanjem vzorca pobarvate s prozornim lakom za nohte. Zaradi tega je stekelec tudi poltrajen. Običajno je mogoče stekelca splakniti in ponovno uporabiti, vendar uporaba laka za nohte pomeni, da je treba stekelca pred ponovno uporabo očistiti z odstranjevalcem laka.

03 od 05

Kako narediti diapozitiv za razmaz krvi

Arindam Ghosh / Getty Images

Nekatere tekočine so premočne barve ali pregoste, da bi jih lahko videli s tehniko mokre montaže. Kri in seme pripravimo kot razmaze. Enakomerno razmazanje vzorca po stekelcu omogoča razlikovanje posameznih celic. Čeprav izdelava razmaza ni zapletena, je za enakomerno plast potrebna praksa.

1. Na predmetno stekelce položite majhno kapljico tekočega vzorca.
2. Vzemite drugo čisto stekelce. Držite ga pod kotom glede na prvi diapozitiv. Z robom tega diapozitiva se dotaknite kapljice. Kapilarno delovanje bo potegnil tekočino v črto, kjer se ravni rob drugega stekelca dotika prvega stekelca. Enakomerno narišite drugo stekelce po površini prvega stekelca in tako ustvarite madež. Ni potrebno izvajati pritiska.
3. Na tej točki bodisi pustite, da se stekelec posuši, tako da ga lahko obarvate, ali pa na razmaz položite pokrovno stekelec.

04 od 05

Kako obarvati diapozitive

MaXPdia / Getty Images

Obstaja veliko metod za barvanje preparatov. Madeži olajšajo ogled podrobnosti, ki bi bile sicer nevidne.

Enostavni madeži vključujejo jod, kristalno vijolična , ali metilensko modro. Te rešitve se lahko uporabljajo za povečanje kontrasta v mokrih ali suhih montažah. Če želite uporabiti enega od teh madežev:

1. Pripravite mokro montažo ali suho montažo s pokrovnim stekelcem.
2. Dodajte majhno kapljico madeža na rob pokrovnega stekelca.
3. Rob robčka ali papirnate brisače položite na nasprotni rob pokrovnega stekelca. Kapilarno delovanje bo potegnilo barvilo čez objektno stekelce in tako obarvalo vzorec.

05 od 05

Običajni predmeti za pregled z mikroskopom

Carol Yepes / Getty Images

Številna običajna živila in predmeti so zanimivi motivi za diapozitive. Tobogani za mokro montažo so najboljši za hrano. Drsniki za suho montažo so dobri za suhe kemikalije. Primeri ustreznih predmetov vključujejo:

• Namizna sol
• Epsom sol
• Alum
• Detergent za pomivanje posode v prahu
• sladkor
• Plesen iz kruha ali sadja
• Tanke rezine sadja ali zelenjave
• Človeška ali hišna dlaka
• Voda iz ribnika
• Vrtna zemlja (kot mokro nasip)
• Jogurt
• Prah